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小鼠ELISA試劑盒以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在得到了廣泛的應用,但操作中的各個(gè)環(huán)節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。將操作中各個(gè)環(huán)節常出現問(wèn)題的原因及解決辦法總結于下,
下面分析小鼠ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法
一、選擇試劑
選擇質(zhì)量?jì)?yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(cháng)(特別是室內溫度較高時(shí)); 3)加完標本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1,標本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2,加樣后及時(shí)放入孵箱。
3,加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4,如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5,ELISA試劑盒標本較多時(shí),請分批操作。
三、 孵育
可能原因:
1,孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗che底;
2,孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?,難以清洗che底。
解決辦法:
1,貼封片或加蓋;
2,按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間。
四、洗板
可能原因:
1,采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2,采用半自動(dòng)洗板機洗板時(shí),洗液量不足,導致洗板不che底;洗板針堵塞,抽吸不wan全;洗板不暢,導致洗板效果差。
3,反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
解決辦法:
1,ELISA試劑盒保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后zui hao在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2,合理安排,或多用幾臺洗板機。
研域(上海)化學(xué)試劑有限公司在廣大科研工作者能隨時(shí)為客戶(hù)提供優(yōu)的服務(wù),小鼠ELISA試劑盒客戶(hù)的滿(mǎn)意和信任是我們的動(dòng)力。從而從整體上提高服務(wù)和分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力,大大提升了服務(wù)水平和客戶(hù)對服務(wù)的滿(mǎn)意程度。